5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達(dá)分析
簡要描述:
5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達(dá)分析,用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質(zhì)粒清除、質(zhì)粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會(huì)用到5-FOA。
產(chǎn)品時(shí)間:2017-09-02
5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸
搜索關(guān)鍵詞:
5-FOA 5-氟乳清酸;URA3基因; Orotine-5'-monophosphate (OMP) decarboxylase;Counter-selection agent 反向篩選劑;CAS:220141-70-8;
產(chǎn)品描述:
5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid,5-FOA)用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質(zhì)粒清除、質(zhì)粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會(huì)用到5-FOA。5-FOA自身對(duì)酵母細(xì)胞無毒,但功能型URA3基因能編碼表達(dá)乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶),將其轉(zhuǎn)化為有毒形式(如5-氟尿嘧啶),從而使得酵母細(xì)胞無法生長。因此,在添加尿嘧啶的5-FOA培養(yǎng)基中,攜帶URA3突變基因的酵母菌能正常生長。5-FOA主要用于釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae(URA3)的鑒定和篩選,雖然曾用于其他菌株,包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe(URA4 and URA5),白色念珠菌Candida albicans(URA3)和大腸桿菌E. coli (pyrF)。酵母雙雜交系統(tǒng)中5-FOA的使用允許構(gòu)建激活結(jié)構(gòu)域雜交文庫來鑒定蛋白-蛋白相互作用。
產(chǎn)品應(yīng)用:
1. 檢測酵母URA3基因表達(dá);
2. 構(gòu)建酵母雙雜交文庫;
3. 其他酵母遺傳學(xué)領(lǐng)域包括基因替換,可移動(dòng)遺傳因子分析和基因突變鑒定研究。
重要參數(shù)
1. CAS NO:703-95-7, 220141-70-8, 207291-81-4
2. 同義名:5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 5-Fluoro orotic acid; 2,6-Dihydroxy-5-fluoropyrimidine-4-carboxylic acid;
3. 純度:≥98%
4. 外觀:類白色至淡黃色粉末
5. 熔點(diǎn):~258°C(高溫非常穩(wěn)定,如煮沸和高壓滅菌)
6. 溶解性:溶于DMSO,微溶于水,乙醇,甲醇
使用方法【詳見懋康整理內(nèi)容】
一、5-FOA培養(yǎng)基配置方法(以粉末形式)
二、5-FOA培養(yǎng)基配置方法(以儲(chǔ)存液形式)
常見問題(FAQs):
Q1. 如何保存5-FOA?
A1. 5-FOA粉末可置于4°C 短期保存,-20°C長期保存。根據(jù)產(chǎn)品特性溶解配置儲(chǔ)存液,需避光置于4°C 短期保存。小量分裝后-20°C長期保存,可穩(wěn)定保存6個(gè)月。
Q2. 5-FOA選擇性培養(yǎng)基pH是多少?
A2.大于pH 4.5條件下5-FOA選擇性被破壞,*的問題在于質(zhì)子化形式的FOA會(huì)滲透進(jìn)入細(xì)胞。一般情況標(biāo)準(zhǔn)配方配置的平板pH=2.8。在pH=6或6.2時(shí)5-FOA*無活性,pH =5.4時(shí)5-FOA活性很好,pH=4或更低時(shí)5-FOA活性達(dá)到100%。正常情況配置5-FOA培養(yǎng)基不用調(diào)pH。
Q3. 預(yù)制的5-FOA選擇性平板能保存多久?
A3. 絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室保存5-FOA預(yù)制平板數(shù)月(3-6個(gè)月)。有的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)顯示能放9個(gè)月和>12個(gè)月(4°C存放),圈上封口膜防止干燥。
Q4. 5-FOA使用濃度?
A4. FOA(1mg/ml)在酵母分子遺傳學(xué)中常用作選擇性試劑;在Ura+細(xì)胞群體重篩選出Ura-細(xì)胞;篩選釀酒酵母菌乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶)突變株。FOA(0.1mg/ml)用來正篩選尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型的硫依賴型嗜熱古細(xì)菌(Sulfolobus acidocaldarius)。
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貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸 | MF2521-1G | 1g | 386 |
5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸 | MF2521-5G | 5g | 1386 |
5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 | MF2522-500MG | 500mg | 316 |
5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 | MF2522-1000MG | 1g | 556 |
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產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
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YNB Without Amino Acids 酵母氮源基礎(chǔ)(無氨基酸) | MS6305-100G | 100g | 330 |
Minimal SD Base SD基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | MS6312-267G | 267g | 768 |
DO Supplement -Ura | MS6319-10G | 10g | 418 |
Uracil 尿嘧啶 | MS0248-25G | 25g | 80 |
D-(+)-Glucose D-葡萄糖(無水) | MS0821-500G | 500g | 75 |
Agar, Plant Tissue Culture 瓊脂粉(植物組培級(jí)) | MX7401-500G | 500g | 180 |
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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達(dá)分析
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