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產(chǎn)品中心
Chemically 大腸桿菌 生化試劑

Chemically 大腸桿菌 生化試劑

簡(jiǎn)要描述:

Chemically 大腸桿菌 生化試劑,Chemically 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞TG1來源于E. coli K-12菌株,是目前生長(zhǎng)速度最快的克隆用大腸桿菌菌株。F′附加體上的lacIq的存在使其能嚴(yán)謹(jǐn)型調(diào)控表達(dá)含大腸桿菌啟動(dòng)子(由lac操縱子序列控制,比如:T5,trc,tac)的載體。。

產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-21

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TG1 Chemically Competent Cell  

大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞



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產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

TG1 Chemically Competent Cell  

大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

MF2327-1000UL

10×100μl

410

MF2327-5000UL

50×100μl

1730



菌株描述

TG1來源于E. coli K-12菌株,是目前生長(zhǎng)速度最快的克隆用大腸桿菌菌株。F′附加體上的lacIq的存在使其能嚴(yán)謹(jǐn)型調(diào)控表達(dá)含大腸桿菌啟動(dòng)子(由lac操縱子序列控制,比如:T5,trc,tac)的載體。TG1是常用的噬菌體展示用菌株,也適用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZΔM15的存在使其可用于藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn)。

TG1菌株基因型:F’ [traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15] supE thi-1 Δ(mcrB-hsdSM)5(rK-mK-) Δ(lac-proAB)


產(chǎn)品描述

本品是大腸桿菌TG1菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1×109 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。


產(chǎn)品包裝


組分編號(hào)

組分名稱

貨號(hào)(規(guī)格)

MF2327-1000UL

MF2327-5000UL

MF2327-A

TG1 Chemically Competent Cell  

10×100μl

50×100μl

MF2327-B

Control Vector puC19, 10pg/μl

10μl

10μl



保存與運(yùn)輸條件:

保存:-80℃保存,六個(gè)月有效。

運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸。


注意事項(xiàng)

1) 感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運(yùn)輸,感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存。


2) 感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化,不可在冰上放置時(shí)間過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。


3) 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí),需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進(jìn)行。


4) 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功,可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到最*-低。


5) 產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10pg/μl),供對(duì)照實(shí)驗(yàn)用。


6) 后續(xù)進(jìn)行陽性菌落的擴(kuò)繁和高純質(zhì)粒的獲取,推薦選用TB培養(yǎng)基(Terrific Broth),優(yōu)于LB或SOC。


7) TG1菌株不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,質(zhì)粒提取時(shí),推薦使用質(zhì)粒提取試劑盒中的去蛋白液,為求去除菌體內(nèi)大量的核酸酶。


8) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


使用方法【所有操作均在無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】

1) 從-80℃冰箱取出取感受態(tài)細(xì)胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物),用手輕彈管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰浴靜置25min。


2) 42℃水浴熱激45s,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2min。此過程不要搖動(dòng)離心管。

3) 向每個(gè)離心管中加700 μl無菌的2YT或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,200 rpm振蕩培養(yǎng)60min,目的使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá),使菌體復(fù)蘇。


4) 低速離心收菌(比如5000rpm,1min),留取100μl左右上清,用槍輕輕吹打重懸菌塊,之后加到含所選質(zhì)粒篩選抗生素的2YT或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于室溫(或37℃)直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)過夜(12-15h)。


【注意】:

a)涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA總量較多,可不用離心,直接取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板;反之,若轉(zhuǎn)化的DNA總量較少,則通過離心(5000 rpm,1min)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。原則是以在平板上能挑到單克隆菌落為宜。


b)新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。

c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。


相關(guān)產(chǎn)品


貨號(hào)

名稱

規(guī)格

MF2327-1000UL

TG1 Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2331-1000UL

BL21 (DE3) Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2332-1000UL

BL21 (DE3) pLysS Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2333-1000UL

Rosetta (DE3) Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2341-1000UL

Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2342-1000UL

OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2339-1000UL

Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2340-1000UL

Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2334-1000UL

BL21 Star (DE3) Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2335-1000UL

BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2481-1000UL

BL21 Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2482-1000UL

OverExpress C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2489-1000UL

ArcticExpress(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2490-1000UL

ArcticExpress(DE3)pRARE2 Chemically Competent Cell化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2491-1000UL

NovaBlue(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2492-1000UL

M15(pREP4) Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2493-1000UL

S17-1 λpir Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MS0021-10G

Chloramphenicol, USP Grade氯*-霉素

10g

MS0019-10G

Kanamycin Sulfate硫酸卡那*-霉素

10g

MF2002-1G

IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

1g





— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】


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Chemically 大腸桿菌 生化試劑

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